9.4.33. Зараженных кроликов, морских свинок и крыс содержат в металлических клетках, расположенных на металлических окрашенных или оцинкованных поддонах. При уборке поддоны дезинфицируют 5% раствором карболовой кислоты или 10% раствором гидроксида натрия.
Соблюдение правил обслуживания зараженных животных контролирует врач ветеринарной медицины.
9.4.34. Обеззараживание инфицированной посуды, трупов животных и мусора, зараженных вирусным материалом, проводят с соблюдением особых мер безопасности.
Использованную посуду вместе с зараженным материалом помещают на месте работы в бачки с крышками и заливают 1-2% мыльным раствором. Бачки запирают на замок, опечатывают, регистрируют в специальном журнале и автоклавируют. Если с каких-либо причин обеззараживаемую посуду нельзя подвергнуть автоклавированию, ее обрабатывают кипячением.
Трупы лабораторных животных сначала погружают в бачки с дезраствором, а в конце рабочего дня специально назначенный работник собирает их в общий бак и сжигает. Если нет возможности сжечь трупы на месте, их вместе с бачками автоклавируют.
В специальном журнале регистрируют общее количество уничтоженных животных.
Мусор из клеток увлажняют 5% раствором лизола или 10% раствором гидроксида натрия, собирают в бачки с крышками и вместе с бачками обеззараживают в автоклаве, после чего мусор сжигают.
9.5. Работа в бактериологическом отделе
9.5.1. В отделе бактериологической диагностики должны быть комнаты для проведения бактериологических исследований и бокс для работы с чистыми культурами, а также место для приготовления растворов, красок, подготовки других материалов.
9.5.2. При бактериологическом исследовании пищевых продуктов посевы на питательные среды проводят в отдельном помещении. Не разрешается эту работу выполнять в секционной или в боксе, где работают с патологическим материалом.
9.5.3. Каждое рабочее место должно быть обеспечено стеклами (предметные - в банке, покровные - в бюксике), бактериологической петлей, стерильными пастеровскими пипетками, пинцетом, ножницами, скальпелем, банками с дезраствором для отработанного стекола (отдельно для предметных и покровных) и для пипеток, спиртовкой или газовой горелкой, пробирками с физиологическим раствором, резиновыми грушами, банкой с ватой. Рабочее место врача ветмедицины необходимо дополнительно обеспечить микроскопом с осветителем и масленкой с иммерсионным маслом.
9.5.4. В отделе кроме рабочих мест работников должно быть оборудовано место для приготовления растворов, красок, подготовки других материалов и отдельное место для покраски мазков.
9.5.5. Место для покраски мазков необходимо обеспечивать набором красок и фиксирующих жидкостей, песочными часами на 1, 2 и 5 минут, бутылем с тубусом или промывкой с дистиллированной водой, конической чашкой (кюветой или аналогичной посудой) с мостиком, газовой горелкой или спиртовкой, пинцетом и фильтровальной бумагой.
9.5.6. Материал, что поступил на бактериологическое исследование, должен рассматриваться, как инфицированный.
9.5.7. Посев и пересев проводят петлей или пастеровской пипеткой над огнем спиртовки или горелки. После посева петлю и нижнюю часть петледержателя прокаливают сначала в нижней, а потом в верхней трети пламени, а пастеровские пипетки помещают в банку с дезраствором.
9.5.8. При выполнении посевов с материала и при пересеве культур пастеровской пипеткой насасывать жидкости необходимо при помощи резиновой груши. Не допускается насасывать жидкости ртом.
9.5.9. Переливать инфицированные жидкости из посуды в посуду через края недопустимо. Для этой цели используют пипетки.
9.5.10. Все манипуляции с культурами возбудителей особо опасных болезней или с материалом, подозрительным на зараженность этими возбудителями, проводят над кюветой.
9.5.11. Мазки из патологического материала или культур до фиксации и покраски необходимо хранить под стеклянным колпаком.
9.5.12. Взвеси исследуемых органов, взятых для заражения, первичные их посевы, а также мазки сохраняют до окончания исследований и выписки экспертизы.
9.5.13. Термостаты, холодильники и шкафы, в которых хранятся посевы (чашки, пробирки и т.п.), в конце рабочего дня опечатывают (или опечатывают комнату, в который они размещаются).
9.5.14. Пипетки, предметные и покровные стекла, посуду после использования сначала обеззараживают 5% раствором хлорамина, потом, как указано в пунктах 9.5.17. и 9.5.18 этих Правил.
9.5.15. Заразный материал из одного помещения в другое или в совместную автоклавную для обеззараживания, необходимо переносить в специальном контейнере, который запирают на замок и пломбируют.
9.5.16. После окончания исследований посев (в пробирках, чашках и т.п.), кусочки органов или взвеси органов, взятые для заражения лабораторных животных, пастеровские пипетки, трупы лабораторных животных подлежат обеззараживанию.
9.5.17. При выделении из патологического материала возбудителей сибирской язвы или споровых анаэробных болезней их обеззараживают автоклавированием в течение 1 часа под давлением в 0,2 МПа (2,0 атм.), или в течение 2 часов под давлением в 0,15 МПа с последующим контрольным посевом на соответствующие питательные среды.
Такой же обработке подлежит инструментарий, стекло и другие предметы, которые были в контакте с инфицированным материалом.
9.5.18. При выделении неспоровых возбудителей или при отрицательных результатах бактериологических исследований обеззараживание проводят автоклавированием в течение 1 часа под давлением в 0,15 МПа (1,5 атм.). При этом инструментарий, стекла и другие предметы, которые были в контакте с инфицированным материалом, обеззараживают кипячением в течение 30 минут в 2% растворе гидрокарбоната натрия.
9.6. Работа в вирусологическом отделе
9.6.1. Работа с возбудителями вирусных заболеваний допускается только в типовых или специально приспособленных лабораторных помещениях, которые соответствуют требованиям полной изоляции и обеспеченные всеми средствами безопасности труда работающего в них персонала.
9.6.2. Все работники вирусологического отдела до и после работы проходят санитарную обработку в пропускнике, который оборудуют индивидуальными шкафами для личных вещей, одежды и обуви.
9.6.3. Исследование патматериала с целью диагностики вирусных заболеваний должно проводиться только в лабораториях, обеспеченных системой изолированных комнат.
9.6.4. Лабораторные комнаты, где проводят работу с вирусным материалом, должны состоять из двух отделений, разделенных стеклянной перегородкой. Одно отделение (внутреннее) является боксом.
9.6.5. Работу с материалом, инфицированным вирусом, проводят в боксе на столе с влагонепроницаемой поверхностью (с металла, мрамора).
Часть рабочего стола (50-80 см) покрывают тремя слоями марли увлажненной 5% раствором хлорамина. На этой части стола не должно быть никаких предметов, кроме материалов, подлежащих исследованию (мыши для вскрытия, взвесь мозга и т.п.).
9.6.6. После окончания работы марлю, которой покрывали рабочее место, опускают в банку с дезраствором, стол дезинфицируют 5% раствором хлорамина, или 4% раствором гидроксида натрия.
9.6.7. Растирание и эмульгирование органов и тканей, содержащих вирус, проводят в ступке с глухим чехлом из 4-х слоев марли или в банке с бусами и притертой пробкой, обернутой чехлом из 4-х слоев марли, пропитанной 5% раствором хлорамина.
9.6.8. Каждый работник отдела во время работы должен пользоваться колпаком и двумя халатами, которые имеют застежку сзади и два кармана спереди. Один халат служит для постоянной работы, другой одевают сверху первого только для работы в боксе. Халаты меняют по мере необходимости, но не реже 1-го раза в три дня. Использованные халаты складывают в металлические коробки и до стирки обеззараживают в автоклаве. Халат и колпаки должны иметь метки о закреплении их за данным подразделением.
9.6.9. Все работы необходимо проводить в марлевой маске (4 слоя марли на нос и рот) и в защитных очках, которые защищают работников от капельной инфекции.
В течение дня работники меняют стерильные марлевые маски по мере необходимости (переход из одного бокса в другой, изменение исследуемого материала, механическое загрязнение и т.п.). Снятые маски стерилизуют в автоклаве.
9.6.10. Во время работы резиновые перчатки, по мере их загрязнения, обеззараживают, опуская руки в перчатках в банку с 5% раствором хлорамина.
9.6.11. По окончании работы руки в перчатках промывают в банке с 5% раствором хлорамина, после чего перчатки снимают и обеззараживают повторно, опуская их на 30 минут в другую банку с таким же раствором и потом кипятят.
9.6.12. Очки дезинфицируют 70% этанолом и хранят на столе в чистой банке. Очки, как и маски, снимают только после обеззараживания рук дезраствором.
9.6.13. При использовании пипеток (градуированных или пастеровских) в них необходимо вкладывать двойные ватные пробки на расстоянии 1 см одна от другой. Пипетирование проводят при помощи резинового баллона.
9.6.14. При заражении лабораторных животных и вскрытии трупов погибших лабораторных животных, зараженных возбудителями вирусных заболеваний, необходимо соблюдать требования безопасности, изложенные в пунктах 9.6.15 - 9.6.20 этих Правил.
9.6.15. Вскрытие или заражение мелких животных проводить в защитных стеклянных настольных боксах, соблюдая правила асептики и предупреждения возможного разбрызгивания инфекционного материала;
- интраназальное заражение животных проводят только наркотированным животным;
- работу с куриными эмбрионами и культурами клеток проводят только в боксах.
9.6.16. Погибших мышей берут корнцангами, вскрывают их на пробковой доске площадью не менее 18 см2, покрытой несколькими слоями марли, увлажненной 5% раствором хлорамина, или в чашках Петри.
9.6.17. Для извлечения мозга мышей закрепляют на пробковой доске булавками спиной вверх. Кожу в области головы протирают 5% раствором хлорамина, снимают кожу с головы, делают разрез черепа острыми глазными ножницами.
9.6.18. Мышей после вскрытия кладут в бачок с дезраствором. Пробковую доску и марлю после окончания работы погружают в 5% раствор хлорамина на 2 часа или же кипятят в течение 1-го часа.
9.6.19. Инструмент для вскрытия стерилизуют кипячением, перед применением его прокаливают над пламенем спиртовки. При работе с одним и тем же животным его периодически протирают тампонами, смоченными водой, после чего погружают в спирт и опаливают.
9.6.20. После использования инструмент (пинцет, ножницы, булавки и т.п.) необходимо немедленно обеззаразить кипячением.
9.6.21. Предметы, которые выносят из бокса, в том числе и клетки с мышами, протирают снаружи марлей, смоченной 5% раствором хлорамина. Марлю после использования погружают в сосуд с таким же раствором. Запрещается выносить за пределы помещения грязную посуду без обеззараживания.
9.6.22. При ведении работ с вирусом бешенства врач ветмедицины должен иметь помощника (лаборанта), которого допускают к работе при условии приобретения им практического опыта и сдачи специального зачета (теоретические знания по технике безопасности и освоения методик заражения и вскрытия мышей, приготовления и разбавления суспензии и т.п.).
9.6.23. Центрифугу для работы с рикетсиозным или вирусным материалом устанавливают в предбокснике. Жидкость разливают в стаканы или центрифужные пробирки с тугоплавкого стекла, плексигласу или металла и обязательно закрывают пробками или завинчивают крышками.
9.6.24. При работе с материалом, который может содержать прионы, необходимо:
- надевать защитный костюм типа І;
- обеззараживание патматериала проводить автоклавированнием в течение 1 часа при давлении в 0,2 МПа (2 атм.);
- с химических дезинфицирующих средств использовать гипохлорид натрия (20% раствор, экспозиция 1 час) или 1Н-2Н (4-8%) раствор гидроксида натрия (экспозиция не менее одного часа);
- обеззараживание инструментария и других предметов необходимо проводить заливкой их 20% раствором гипохлорида натрия или 1Н-2Н раствором гидроксида натрия оставляя при температуре 20°С на ночь.
9.7. Работа в серологическом отделе
9.7.1. Материал, который поступил в отдел на исследование, необходимо хранить в холодильнике. Не допускается оставлять его в коридоре или других местах, доступных для посторонних лиц.
9.7.2. В лаборатории кровь и биологические жидкости должны считаться потенциально инфицированными материалами.
9.7.3. Мытье посуды после предварительной дезинфекции необходимо проводить в резиновых перчатках.
9.7.4. В случае попадания крови, сыворотки или культуры лептоспир на кожу необходимо обработать ее тампоном, смоченным 70% этанолом, в течение 2 минут.
Если кровь или культура попали на слизистые оболочки, их обрабатывают струей воды, а потом одним из приведенных растворов: 1% раствором борной кислоты, 1% раствором протаргола, а полость рта и горло обрабатывают 70% этанолом, 1% раствором борной кислоты или 0,05% раствором перманганата калия.
9.7.5. Не допускается насасывать материал в пипетки ртом. Для этого необходимо пользоваться автоматическими пипетками, а в случае их отсутствия - резиновыми грушами, индивидуальными пипетками Флоринского. Компоненты необходимо разливать аппаратом Флоринского, шприц-автоматом или другими устройствами.
9.7.6. После окончания работы со столов убирают все лишнее и протирают их 5% раствором хлорамина или фламбируют.
9.7.7. Отработанные пробы крови засыпают хлорной известью или заливают 10% раствором гидроксида натрия, нейтральным гипохлоридом кальция в соотношении 200 гр. на 1 литр, перемешивают и выдерживают 60 минут.
9.7.8. Промытые пробирки, после предварительной их дезинфекции, кипятят 30 минут в закрытой посуде в 0,5% растворе моющих средств или в 2% растворе гидрокарбоната натрия в течение 15 минут.
После учета реакции пробирки заливают раствором моющего средства, кипятят в течение 10-15 минут, после чего их моют.
9.7.9. Отработанное предметное стекло выдерживают несколько дней в хромовой смеси, промывают в проточной воде, вытирают чистой ветошью.
Чистые стекла сохраняют в смеси спирта и эфира в соотношении 1:1 в банке с притертой пробкой.
9.7.10. С дезрастворов применяют: 10% раствор гидроксида натрия, 3% раствор хлорамина, 6% переоксид водорода с 0,6% моющих средств (Лотос, Астра, Прогресс), 4% раствор формальдегида, 0.5% нейтральный гипохлорид кальция. Время обеззараживания 60 минут.
Дезинфицирующие растворы используют только один раз.
9.7.11. Посуда для проведения дезинфекции должна быть четко обозначена и иметь крышки.
9.7.12. Обработка посуды, агглютинативных пластин, стекол при работе с культурами лептоспир проводится согласно с Наставлением к лабораторной диагностике лептоспироза.
Пересев штаммов лептоспир необходимо проводить в боксе.
9.7.13. Ватные пробки от пробирок с кровью сжигают или собирают в бачки и стерилизуют автоклавированием.
9.7.14. Для доставки в лабораторию проб кожсырья используют тару, которая соответствует за своими габаритами внутреннему объему автоклава. Пробы немедленно стерилизуют и только тогда пускают в работу.
9.7.15. Перекладывать пробы в автоклав или в иную тару и автоклавировать их разрешается с соблюдением следующих правил:
- при работе с неавтоклавированным сырьем необходимо обувать резиновые сапоги, надевать дополнительный халат, резиновый фартук и перчатки.
- перекладывать неавтоклавированные пробы необходимо только на клейонке, которую после окончания работы необходимо простерилизовать в автоклаве.
- тару, в которой доставляли пробы, автоклавируют, а металлическую посуду опаливают факелом или паяльной лампой.
- по окончании работы резиновую спецодежду необходимо протереть дезраствором, халат проавтоклавировать, перчатки прокипятить.
9.8. Диагностика микозов и микотоксикозов
9.8.1. При проведении микологических исследований необходимо выполнять требования охраны труда, предусмотренные для бактериологической диагностики.
9.8.2. Для предупреждения заражения помещений лаборатории спорами грибов посевы с патматериала и кормов необходимо проводить в боксе с соблюдением правил безопасности, изложенных в подразделе 9.2 этих Правил.
9.8.3. Экстракцию кормов, выпаривание экстрактов и хроматографию необходимо проводить в вытяжном шкафу при включенной вентиляции. При этом не допускается использовать открытое пламя и электроплиты с открытой спиралью.
9.8.4. Трупы лабораторных животных, которые использовали для биологических исследований, уничтожают путем сжигания.
9.8.5. Культуры грибов и зараженный ими материал необходимо автоклавировать, по возможности, в день окончания исследований.
9.8.6. Предметные и покровные стекла, пипетки, бывшие в использовании, вначале обеззараживают 5% раствором хлорамина, а потом вместе с использованными чашками Петри автоклавируют под давлением в 0,15 МПа (1,5 атм.) в течение 2 часов.
9.8.7. Микотоксины хранят в сейфе или в отдельном, закрытом на замок шкафу.
9.8.8. Остатки неиспользованных кормов, из которых при исследовании были выделены токсичные или патогенные грибы, через 1 месяц после выдачи экспертизы уничтожают сжиганием.
9.8. 9. При работе с исследуемым материалом руки обрабатывают 70% этанолом.
9.8.10. В конце рабочего дня в рабочих помещениях проводят влажную уборку с использованием 5% раствора хлорамина.
9.9. Работа в паразитологическом отделе
9.9.1. Работу с заразным материалом проводят исключительно в боксе. Препараты, которые подготовлены на исследование, должны быть размещены на специальных подносах (эмалированных или изготовленных из материала, который легко обеззараживается). После исследования материал автоклавируют или сжигают. Предметные и покровные стекла, пастеровские пипетки и иная стеклянная посуда, кюветы, подносы обеззараживают дезинфицирующими препаратами.
9.9.2. Штаммы патогенных культур (токсоплазмы, трихомонады), личинки гельминтов (финны, трихинеллы и т.п.) и членистоногие должны быть на учете и регистрироваться в журнале учета выделенных культур и их уничтожения (приложение 2).
9.9.3. В случаях рассеивания заразного материала срочно принимают меры по обеззараживанию места, где произошла авария.
9.9.4. При работе с материалом, который может обуславливать появление аллергических процессов (аллергенные клещи и др.), необходимо принимать меры для защиты дыхательных путей (работать в марлевой маске, работу выполнять в настольном боксе).
9.9.5. При работе в паразитологическом отделе необходимо придерживаться такого же противоэпидемического режима, как и при работе в бактериологическом отделе (изложенного в подразделе 9.5 этих Правил).
9.10. Работа в химико-токсикологическом отделе
9.10.1. Работу с горючими и ядовитыми веществами необходимо проводить только в вытяжном шкафу.
9.10.2. Для проведения работ с взрыво- и огнеопасными веществами их берут в минимальном количестве. Общий запас таких веществ в производственных помещениях не должен превышать дневной потребности, а на рабочих местах - в количестве, которое необходимо для выполнения определенной операции.
9.10.3. Нагрев легковоспламеняющихся веществ (эфир, бензин, бензол, ацетон, спирт и др.) проводят в вытяжном шкафу на песочной (или водяной) бане с закрытым электронагревателем. Не разрешается пользоваться открытым пламенем и опускать колбу с легковоспламеняющейся жидкостью в горячую воду без предварительного постепенного подогрева.
При перегонке легковоспламеняющихся жидкостей в холодильник сначала пускают холодную воду, а потом включают нагрев бани.
9.10.4. Отработанные горючие жидкости собирают в специальную герметическую тару и передают для регенерации или уничтожения. Слив их в канализацию не допускается.
9.10.5. При приготовлении рабочих растворов, навесок химических веществ, которые вызывают поражение кожи или проникают через нее, а также при работе с веществами, сведения о действии которых на кожу отсутствуют, необходимо пользоваться резиновыми перчатками.
9.10.6. На стаканы с реактивами наклеивают этикетки с названиями веществ.
9.10.7. При работе с концентрированными кислотами, щелочами и органическими растворителями необходимо соблюдать такие меры безопасности:
- все работы проводить у вытяжном шкафу;
- надевать очки, резиновые перчатки, нарукавники и резиновый фартук;
- концентрированную кислоту отбирать из сосуда только при помощи специальной пипетки с грушей, сифоном или мерным цилиндром;
- при приготовлении растворов кислот в сосуд вначале вливать необходимое количество воды, после чего, помешивая, медленно вливать кислоту;
- при приготовлении раствора щелочей нужно навеску щелочи опустить в сосуд с широким горлом, залить необходимым количеством воды и тщательно перемешать;
- дробление больших кусков едкой щелочи проводят в специально отведенном месте. При выполнении этой работы необходимо пользоваться защитными очками, фартуком, перчатками и респиратором;
- концентрированные кислоты и щелочи можно выливать в раковину после их предварительной нейтрализации или разбавления водой.
9.10.8. При работе с фосфорорганическими ядохимикатами необходимо придерживаться таких правил безопасности:
- пробы патологического материала, воды, кормов и других объектов исследований брать только в защитном фартуке и резиновых перчатках. Пробы разрешается брать в стеклянные банки с притертыми пробками или в другую герметически закрывающуюся посуду;
- поступившие для исследования пробы хранить в вытяжных шкафах;
- после окончания работы обработать 1% раствором гидроксида натрия или гидрокарбоната натрия предметы и спецодежду, с последующим промыванием их чистой водой;
- для обработки рук пользоваться нашатырным спиртом, на половину разбавленным водой (12,5% раствор);
- загрязненную тару обезвреживать промыванием горячим раствором моющих средств и затем водой;
- при появлении признаков отравления (головная боль, тошнота, рвота, учащение дыхания, усиленное выделение слюны, потливость, боли в животе, подергивание мышц и др.) немедленно обратиться к врачу.
9.10.9. При работе с ртутью необходимо соблюдать следующие меры безопасности: